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《应用色谱技术问答》之液相色谱篇-作者-施超欧(恐龙)

纯甲醇可以做流动相吗?
问：有一个样品，用C18柱，60%甲醇水在15分钟内没有出峰，后用90%甲醇在3分钟左右出峰，但和杂质分得不好。试了纯甲醇，峰形、对称性都不错，线性也还可以。是否可用纯甲醇作流动相？
答: 甲醇是HPLC最常用的流动相，如果能保证分离完全，峰对称性、线性都没问题，出峰时间合理，理论上100％甲醇作为流动相是没问题的。但如果组分保留时间很短，一般情况下需要进行调整。比较合理的建议是：
（1）更换色谱柱，一是用较短的同型号的柱子，二是用C8柱代替C18柱，三是用其它保留性能弱的C18柱、添加水或其它缓冲液。
（2）改变流动相，可以考虑不用甲醇或少用，而增加乙腈、四氢呋喃，另加改性剂。同时需注意样品在流动相中的溶解度问题。如果采用单一的流动相，则不利于调节流动相极性。
（3）改变洗脱方式，如有必要进行梯度分离。
（4）更换体系，可考虑改用正相色谱，如用硅胶柱分析。

flytiger603

以前看到过有些文献中，是用甲醇和乙腈作为流动相的，通过不同的比例和流速来调节出峰时间的
好像是反相色谱，具体的东西忘了
当时觉得很奇怪，问过一些人，但都没说个所以然来。。。

honghao

采用多元混合溶剂来测比较好，最好不要用单纯的有机相，这样可能有些峰会重叠在一起，影响分离效果。