什么纯度的水可以满足HPLC分析的要求,如何得到色谱用水?
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《应用色谱技术问答》之液相色谱篇-作者-施超欧(恐龙)
什么纯度的水可以满足HPLC分析的要求,如何得到色谱用水?
答: 配制HPLC流动相的水应该是电导率为18.2 MΩ/cm的超纯水,并通过0.22um的滤膜,除去颗粒物、有机物、无机离子及CO2等气体的超纯水,但在实际操作中,可根据不同的仪器要求和具体情况掌握。
在HPLC分析中,MS检测器的要求最高。经严格过滤的、水质新鲜的市售优质纯净水或蒸馏水可以满足四极杆MS的基本要求,但很容易受塑料瓶材料中增塑剂等添加剂的污染。对于研究级的离子阱或飞行时间质谱,必须使用新鲜的超纯水。
对于近些年来使用越来越多的ELSD检测器,水中的颗粒将直接影响仪器的灵敏度和噪音,最好使用超纯水。
对于UV或DAD、示差折光和荧光检测器,经过二次离子交换处理的纯水,再经过滤和脱气后,基本可以满足分析要求。但对于低波长的UV检测或梯度分析,最好使用超纯水。
HPLC用水可以通过以下几个方面来得到:
(1)专门的纯水机或超纯水机。二次去离子水经过纯水机或超纯水机处理(离子交换,紫外灯杀菌和0.22 mm滤膜过滤)后,可以达到电导率大于18 MΩ/cm的要求,能够满足HPLC和生物培养的需要。这种水成本较高,但质量保证,使用方便。
(2)去离子水重蒸。将去离子水经石英蒸溜或亚沸后使用,注意不能将所有水都蒸出来,蒸出3/4为宜,剩下的因离子和杂质含量较高而必须弃去。
(3)市场上的纯净水或蒸馏水,电导率在10-18 MΩ/cm之间,选择质优的产品基本可以满足一般HPLC分析的要求。
(4)其它途径。有些生产单位自己有类似级别的水如注射用水、电子厂的清洗水、锅炉蒸馏水等,过滤后可以直接用于普通HPLC分析。
不管采用何种途径,配制流动相应用新鲜水,水质越高放置时间越短,即使用专门的纯水机或超纯水机处理的水,其放置时间也不应超过3天。
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